Plateforme CIMNA

Qui sommes-nous ?

Le Centre d'Immunomonitorage Nantes Atlantique (CIMNA), plateforme du CHU NANTES intégrée au Laboratoire d'Immunologie Biologique, propose des services dans le domaine de l'immunomonitorage clinique.

Le CIMNA offre des prestations de services et des activités de conseil en immunomonitorage destinées à la recherche clinique et thérapeutique pour des investigateurs académiques ou privés (auto-immunité, cancer, infection, transplantation, allergologie…).

La plateforme propose des tests conventionnels ou innovants, contrôlés et validés, pour le suivi de la réponse immunitaire de patients inclus dans des essais thérapeutiques ou des études physiopathologiques.

Le CIMNA peut également vous apporter son expertise dans le transfert de technologie, développement de technique et validation de méthode dans un environnement ISO15189.

Le CIMNA dispose d’automates pour la cytométrie en flux conventionnelle, le dosage d’analytes ou encore pour des analyses ex-vivo :

• 2 cytomètres en flux : CytoFLEX 13 paramètres (Beckman Coulter)
• 1 instrument Luminex xMAP® :  50 analytes (MAGPIX)
• 1 plateforme de microfluidique ELLA (Protein Simple)
• 1 lecteur ELISPOT: Bioreader 5000Pro (Bio-Sys)
• 1 lecteur ELISA : ELx800 (Biotek)
• 1 salle de culture cellulaire équipée
• Zone de stockage : cuve Azote, congélateurs -20°C, -80°C

Le CIMNA propose des analyses validées pour l’immunomonitorage sur différents types d’échantillons (sang frais, sang congelé, sérum, plasma, PBMC etc…). Avec son expertise, le CIMNA peut également développer de nouvelles techniques et ainsi répondre aux besoins spécifiques de vos projets.

La cytométrie en flux permet d’analyser individuellement des cellules en suspension après marquage par des anticorps spécifiques dirigés contres des marqueurs membranaires et intracellulaires couplés à des fluorochromes dont les signaux sont ensuite détectés et mesurés par les lasers d’un cytomètre en flux.

Applications :

• Profils cellulaires et identifications des sous populations (fréquences et valeurs absolues, panels validés existants)
  • Lymphocytes : T, naifs/mémoires, T régulateurs, B, NK, NKT, MAIT/Tactivés, TCRgd, DCs, monocytes…
  • Cellules myéloïdes suppressives : MDSC
  • Monocytes classiques, non classiques, intermédiaires
  • Cellules dendritiques : cDC, pDC
  • Granulocytes : neutrophiles, éosinophiles, basophiles
  • Cellules lymphoïdes innées : ILC
  • Classes et sous-classes d’immunoglobulines membranaires (IgA1, IgA2, IgD, IgM, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4)
  • HLA-DR sur les monocytes
• Analyse de la fonction cellulaire (ICS)
  • Test de phagocytose
  • Production de cytokines pas les lymphocytes T après stimulation
  • Production de cytokines pas les cellules dendritiques après stimulation
  • Production de cytokines pas les monocytes après stimulation
• Mesure d’occupation de récepteur (receptor occupancy/RO)
• Analyse des lymphocytes T spécifiques d’antigènes par tétramères
• Développement de nouveaux panels à façon sur demande (jusqu’à 13 marqueurs simultanés)

Le CIMNA dispose de deux techniques pour répondre aux demandes d’analyses multiplex.

La première est la technique Luminex qui permet de doser simultanément de nombreuses cibles protéiques ou nucléiques (≤ 50 cytokines, chimiokines, facteurs de croissance…). A l’aide de billes magnétiques, ce procédé, basé sur la technologie xMAP®, repose sur le principe d'un ELISA combiné à de la cytométrie.

La deuxième technique proposée est le système ELLA. C’est une plateforme d’immunoessai automatisée (SimplePlexTM) ayant un système de détection rapide et très sensible de protéines dans différents types d’échantillons biologiques. Il s’agit d’un système de cartouche microfluidique permettant le dosage jusqu’à 8 analytes simultanément dans le même échantillon.

Applications :

• Dosage d’analytes en multiplex sur sérum, plasma, surnageants de culture...
  • Dosage de cytokines, chemokines (inflammatoires et autres…)
  • Dosage d’immunoglobulines
  • Dosages d’analytes dans le cadre du métabolisme, cardiovasculaire, transplantation, cancer, neuroscience, osseux…

L’ELISA (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay) est une technique d’immunoabsorption par enzyme liée, principalement utilisée afin de détecter et/ou de doser un antigène ou un anticorps grâce à une réaction enzymatique colorimétrique

Applications :

• Dosage d’analytes en simplex sur sérum, plasma, surnageants de culture….
  • Dosage de cytokines, chemokines (inflammatoires et autres…)
  • Dosage de médicaments et d’anticorps anti médicaments (Infliximab, Vedolizumab…)
  • Dosage d’analytes dans le cadre du métabolismes, cardiovasculaire, transplantation, cancer, neuroscience, osseux…

• Isolement de PBMC par gradient de densité et congélation
• Collection de sérum, plasma
• Congélation de sang total pour analyse de cytométrie (méthode développée par la plateforme, cf Braudeau et al., Cytometry Part B, 2021)
• Isolement de cellules par sélection magnétique pour congélation

• Stimulation de cellules pour analyses fonctionnelles (ELISpot, Cytométrie en flux, …)
• Tests de prolifération cellulaire
• Isolement de cellules par sélection magnétique pour tests ex-vivo

L’ELISpot est une technique qui permet de mesurer la fréquence de lymphocytes T sécréteurs de cytokines ou de lymphocytes B sécréteurs d’immunoglobulines à l’aide d’une technique immunoenzymatique en réponse à une stimulation spécifique ou non spécifique d’antigène.

Applications :

• Analyse de production de cytokines sur cellules isolées après stimulation (antigènes viraux, antigènes vaccinaux…) par techniques immunoenzymatique

Expertise scientifique

Le Pr Régis JOSIEN, le Dr Jérôme MARTIN ainsi que toute l’équipe se mettent à votre disposition pour vous apporter leurs expertises pour vos projets dans le domaine de l’immunologie, en vous accompagnant du design de votre étude jusqu’à l’analyse des résultats.

Le CIMNA est intégré au laboratoire de biologie médicale dans le service d’Immunologie du CHU de Nantes, certifié ISO15189. Dans cet environnement, la plateforme a une politique rigoureuse de suivi de la qualité et met tout en œuvre pour maintenir un cadre réglementaire. Le CIMNA respecte le manuel qualité en vigueur dans le laboratoire.

Local :

• Le CIMNA est une plateforme de la Structure Fédérative de Recherche Bonamy qui fédère l'ensemble des laboratoires de recherche et les plateformes technologiques dans le domaine de la biologie-santé à Nantes.
• LabEx IGO : Laboratoire d’Excellence Immunotherapy Graft Oncology, réseau d’excellence visant à développer des immunothérapies innovantes, labellisé et financé dans le cadre des programmes d’investissement d’avenir (PIA) gérés par l’Agence Nationale de la Recherche (ANR)

International :

Le CIMNA a participé aux projets européens suivants :

• Réseau européen EU FP7 « The One study »
• Réseau européen EU FP7 « Bio-DriM »
• Réseau européen EU COST - ENTIRE
• Réseau européen EU COST - A FACTT